Комплексная оценка жидкостной цитологии и молекулярных маркеров (ВПЧ, микроРНК, ИППП) из единого образца в диагностике интраэпителиальных неоплазий шейки матки

Цель исследования. Продемонстрировать возможность комплексной оценки молекулярно-цитологических параметров из единого образца биоматериала (в стабилизирующей жидкостной среде), выявить закономерности их ассоциации со степенью интраэпителиальной неоплазии шейки матки.

Материалы и методы. Проведено ретроспективное многоцентровое исследование с участием 87 пациенток репродуктивного возраста (декретированные группы 21, 24, 27 лет), проходивших цитологический скрининг (ПАП-тест) в учреждениях Гомеля и Гомельской области в феврале – марте 2026 г. Биоматериал исследовали методом жидкостной цитологии (ЖЦ) (система Бетесда, TBS 2014). Из остаточного объема единого образца выполняли генотипирование 22 типов вируса папилломы человека (ВПЧ) (полимеразная цепная реакция (ПЦР) в реальном времени), исследование на инфекции, передаваемые половым путем (ИППП) (Ureaplasma spp., Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium), и количественный анализ экспрессии шести маркерных микроРНК (miR-21, miR-29b, miR-145, miR-451a, miR-1246, miR-1290) с расчетом диагностического параметра miR-CERVIX. Статистический анализ включал критерий Краскела — Уоллиса, корреляционный анализ Спирмена и точный критерий Фишера.

Результаты. Установлена статистически значимая зависимость уровня экспрессии микроРНК от степени цитологических изменений (p < 0,001). Медианные значения параметра miR-CERVIX составили: при NILM — 0,33 [0,15; 0,46], при LSIL — 0,61 [0,56; 0,64], при HSIL — 0,69 [0,57; 0,77] и были значимо выше при сравнении NILM с группами LSIL и HSIL (р < 0,001). В группе HSIL ВПЧ высокого онкогенного риска выявлен в 100 % случаев, при этом доминировал ВПЧ 16-го типа (изолированно или в комбинации). Мультиинфекция ВПЧ чаще встречалась в группах с LSIL и HSIL. Корреляционный анализ установил статистически значимую зависимость (p < 0,001) уровня экспрессии микроРНК от степени цитологических изменений (NILM, LSIL, HSIL).

Выявлена высокая вариабельность индекса miR-CERVIX в группе NILM (0,01–0,74), что указывает на субклинические молекулярные сдвиги и обосновывает углубленное обследование при значениях ≥ 0,60. Кроме того, индекс miR-CERVIX позволяет персонализировать тактику ведения в группе LSIL: значения < 0,60 ассоциированы с благоприятным течением, ≥ 0,75 — с риском прогрессирования.

Заключение. Комплексная оценка ЖЦ и молекулярных маркеров из единого образца устраняет диагностические ошибки на преаналитическом этапе, обеспечивает высокую сопоставимость данных, оптимизирует клинический маршрут, исключая необходимость повторных визитов для забора материала.

Индекс miR-CERVIX является чувствительным маркером степени CIN. Он позволяет проводить дифференциальную стратификацию риска в группах NILM и LSIL, тогда как в группе HSIL выступает объективным подтверждением молекулярной агрессии опухоли. Комплексный подход, включающий оценку ВПЧ-статуса, профиля микроРНК, формирует методологическую базу для оптимизации диагностического триажа и требует дальнейшей проспективной валидации с гистологическим подтверждением.

1. Bray F, Laversanne M, Sung H, Ferlay J, Siegelet R, Soerjomataram I, Jemal A. Global cancer statistics 2022: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin. 2024;74(3):229-263. DOI: https://doi.org/10.3322/caac.21834

2. Океанов А.Е., ред. Рак в Беларуси: цифры и факты, ٢٠١٥–٢٠٢٤. Минск: Белорусский канцер-регистр; ٢٠٢٥. Режим доступа: https://omr.by/spetsialistam/sbornik-statistika-onkologicheskikh-zabolevanij Дата доступа: 20.05.2026.

3. Schiffman M, Doorbar J, Wentzensen N, de Sanjosé S, Fakhry C, Monk B, et al. Carcinogenic human papillomavirus infection. Nat Rev Dis Primers. 2016;2:16086. DOI: https://doi.org/10.1038/nrdp.2016.86

4. Pardini B, De Maria D, Francavilla A, Di Gaetano C, Ronco G, Naccarati A. MicroRNAs as markers of progression in cervical cancer: a systematic review. BMC Cancer. 2018;18(1):696. DOI: https://doi.org/10.1186/s12885-018-4590-4

5. Babion I, Snoek BC, Novianti PW, Jaspers A, van Trommel N, Heideman DAM, et al. Triage of high-risk HPV-positive women in population-based screening by miRNA expression analysis in cervical scrapes. Clin Epigenetics. 2018;10:76. DOI: https://doi.org/10.1186/s13148-018-0509-9

6. Kniazeva M, Zabegina L, Shalaev A, Smirnova O, Lavrinovich O, Berlev I, et al. NOVAprep-miR-Cervix: New Method for Evaluation of Cervical Dysplasia Severity Based on Analysis of Six miRNAs. Int J Mol Sci. 2023;24(11):9114. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms24119114

7. Волченко Н.Н., Сушинская Т.В., Борисова О.В., Мельникова В.Ю., Петров А.Н. Сравнительный анализ традиционной и жидкостной цитологии мазков из шейки матки. Исслед. и практ. в медицине. 2019;6(1):83-90. DOI: https://doi.org/10.17709/2409-2231-2019-6-1-8

8. Баяндина Н.Н., Славнова Е.Н. Цитологический метод в ранней диагностике рака шейки матки: эволюция, принципы, технологии, перспективы. Онкология. Журн. им. П.А. Герцена. 2023;12(2):49-55. DOI: https://doi.org/10.17116/onkolog20231202149

9. Makde MM, Sathawane P. Liquid-based cytology: Technical aspects. CytoJournal. 2022;19:41. DOI: https://doi.org/10.25259/CMAS_03_16_2021

10. Nayar R, Wilbur DC. The Bethesda System for Reporting Cervical Cytology: Definitions, Criteria, and Explanatory Notes. 3rd ed. Springer; 2015.

11. Liao G, Jiang X, She B, Tang H, Wang Z, Zhou H, et al. Multi-Infection Patterns and Co-infection Preference of 27 Human Papillomavirus Types Among 137,943 Gynecological Outpatients Across China. Front Oncol. 2020;10:449. DOI: https://doi.org/10.3389/fonc.2020.00449

12. Carreras R, Alameda F, Bellosillo B, Lloveras B, Miralpeix E, Mancebo G, & Solé-Sedeno J. M. Utility of Human Papillomavirus Genotyping in the Management of Low-Grade Squamous Intraepithelial Lesions. Journal of Lower Genital Tract Disease. 2028;22(1):13-16. DOI: https://doi.org/10.1097/LGT.0000000000000354

13. Bosch FX, de Sanjosé S. The epidemiology of human papillomavirus infection and cervical cancer. Journal of Infectious Diseases. 2007;195(Suppl 1):S14-S25. DOI: https://doi.org/10.1086/511246

14. de Sanjosé S, Diaz M, CastellsaguÉ X, Clifford GM, Bruni L, Muñoz N, et al. Worldwide prevalence and genotype distribution of cervical human papillomavirus DNA in women with normal cytology: a meta-analysis. Lancet Infect Dis. 2007;7(7):453-459. DOI: https://doi.org/10.1016/S1473-3099(07)70158-5

15. Fernandes JV, de Medeiros Fernandes TA, de Azevedo JC, Cobucci RN, de Carvalho MG, et al. Link between chronic inflammation and human papillomavirus-induced carcinogenesis (Review). Oncol Lett. 2015;9(3):1015-1026. DOI: https://doi.org/10.3892/ol.2015.2884

16. Long T. Severe Inflammation Indicates High Risk of HSIL: From a Cross-Sectional Study. J Cancer Metastasis Treat. 2019;5:45. DOI: https://doi.org/10.20517/2394-4722.2019.45

17. Vieira-Baptista P, Lima-Silva J, Pinto C, Saldanha C, Beires J, Martinez-de-Oliveira J, Donders G. Bacterial vaginosis, aerobic vaginitis, vaginal inflammation and major Pap smear abnormalities. European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases. 2016;35(4):657-663.

18. Wu J, Cai H, Xiang YB, Matthews CE, Ye F, Zheng W, et al. Intra-individual variation of miRNA expression levels in human plasma samples. Biomarkers. 2018 May-Jun;23(4):339-346. DOI: https://doi.org/10.1080/1354750X.2018.1427794