ХАРАКТЕРИСТИКА ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ M. TUBERCULOSIS, ОПРЕДЕЛЕННОЙ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИМИ И ФЕНОТИПИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

Цель: определить генетическую и фенотипическую лекарственную устойчивость M. tuberculosis к основным и резервным противотуберкулезным лекарственным средствам. Материалы и методы. Изучены мутации генов у 247 штаммов М. tuberculosis, связанные с лекарственной устойчивостью к изониазиду, рифампицину, фторхинолонам и аминогликозидам. Генетическая устойчивость возбудителя туберкулеза определялась с помощью LPA (GenoType® MTBDRsl MTBDRplus и MTBDRsl, ver.2.0). Результаты исследования подтверждены определением фенотипической лекарственной устойчивости в автоматизированной системе BACTEC™ MGIT™ 960. Результаты. Определены штаммы лекарственно-устойчивых M. tuberculosis, циркулирующих на территории Гомельской области, микробиологическими методами подтверждена высокая достоверность определения молекулярно-генетической лекарственной устойчивости возбудителя туберкулеза (к изониазиду и рифампицину - в 97,2 %, к фторхинологам - в 85,1 %, к аминогликозидам - 92,3 % случаев). Выявлен значительный удельный вес штаммов лекарственно-устойчивых M. tuberculosis с мутациями генов (45,1 %), не включенных в систему GenoType® MTBDRsl. Заключение. Значительная генетическая вариабельность лекарственно-устойчивых штаммов M. tuberculosis требует комплексного использования всех методов определения устойчивости к лекарственным препаратам.

микобактерии туберкулеза, лекарственная устойчивость, мутации, молекулярно-генетические методы

1. World Health Organization. Global tuberculosis control: WHO report 2011. WHO/HTM/ TB/2011.16. World Health Organization, Geneva, Switzerland; 2011.34 р.

2. GenoType® MTBDRplus. Руководство к пользованию. IFU304A02. Молекулярно-генетическое исследование для идентификации комплекса M. tuberculosis и определение его устойчивости к рифампицину и изониазиду в клинических образцах и культивированных образцах; 2012. 63 с.

3. GenoType® MTBDRsl. Руководство к пользованию. IFU317A02. Молекулярно генетическое исследование для идентификации комплекса M. tuberculosis и определения его устойчивости к фторхинолонам и аминогликозидам/циклическим пептидам из образцов мокроты или культивированных образцов; 2015. 13 с.

4. Brossier F, Veziris N, TruffotPernot C. Performance of the genotype MTBDR line probe assay for detection of resistance to rifampin and isoniazid in strains of Mycobacterium tuberculosis with low and highlevel resistance. J Clin Microbiol 2006;44(10):3659-64.

5. Pitaksajjakul P, Wongwit W, Punprasit W. Mutations in the gyrA and gyrB genes of fluoroquinoloneresistant Mycobacterium tuberculosis from TB patients in Thailand. Southeast Asian J Trop Med. Public Health. 2005;36(4):228-36.

6. Lau R, Ho P, Kao R. Molecular characterization of fluoroquinolone resistance in Mycobacterium tuberculosis: functional analysis of gyrA mutation at position 74. Antimicrob Аgents Chemother. 2011;55(2):608-14.

7. Malik S, Willby M, Sikes D. New insights into fluoroquinolone resistance in Mycobacterium tuberculosis: functional genetic analysis of gyrA and gyrB mutations. PLoS One. 2012;7(6):110.

8. Nosova E, Bukatina A, Isaeva Yu. Analysis of mutations in the gyrA and gyrB genes and their association with the resistance of Mycobacterium tuberculosis to levofloxacin, moxifloxacin and gatifloxacin. J Med Microbiol. 2013;62(1):108-13.

9. Via LE, Cho SN, Hwang S. Polymorphisms associated with resistance and crossresistance to aminoglycosides and capreomycin in Mycobacterium tuberculosis isolates from South Korean Patients with drugresistant tuberculosis. J Clin Microbiol. 2010; 48(2):402-11.

10. Zaunbrecher MA, Sikes RD, Metchock B. Overexpression of the chromosomally encoded aminoglycoside acetyltransferaseeis confers kanamycin resistance in Mycobacterium tuberculosis. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2009;106(47):20004-9.

11. Jugheli L, Bzekalava N, de Rijk P. High level of crossresistance between kanamycin, amikacin, and capreomycin among Mycobacterium tuberculosis isolates from Georgia and a close relation with mutations in the rrs gene. Antimicrob. Agents Chemother. 2009;53(12):5064-68.

12. Адамбеков ДА, Адамбекова АД, Кадыров АС. Частота встречаемости мутаций и их сочетаний в генах, ответственных за множественную лекарственную устойчивость М. tuberculosis в Кыргызской Республике при исследовании GenoТype MTBDR plus. Здравоохранение (Минск).2017;2:14-7.

13. MGIT Procedure Manual for BactecTM MGITTM 960 TB System (Also applicable for Manual MGIT) Mycobacteria Growht Indicator Tube (MGIT). Culture and Drug Susceptibility Demonstration Projects.Foundation for Innovative New Diagnostics. [Электронный ресурс] [дата обращения: 2018 Июн 17]. Availablefrom: http:// www.ipaqt.org/wpcontent/uploads/2013/02/MGITProcedureManual.pdf.

14. Носова ЕЮ, Хахалина АА, Галкина КЮ, Краснова МА, Крылова ЛЮ, Сафонова СГ. Определение множественной и широкой лекарственной устойчивости Mycobacterium tuberculosis с помощью различных молекулярных тестсистем и BACTEC™ MGIT™ 960. Туберкулез и Социально-Значимые Заболевания. 2015;3:11-7.