zdorПроблемы здоровья и экологииHealth and Ecology Issues2220-09672708-6011Gomel State Medical University10.51523/2708-6011.2005-2-4-26zdor-396Research ArticleНОВЫЕ ТЕХНОЛОГИИNEW TECHNOLOGIESПРЕИМУЩЕСТВА ПЕРИПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ ЭКСПРЕССИИ И «КАССЕТНОГО» МУТАГЕНЕЗА В ТЕХНОЛОГИИ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВADVANTAGES OF PERIPLASMATIC EXPRESSION AND «CASSETTE» MUTAGENESIS OF RECOMBINANT PROTEINS TECHNOLOGYПоходняЮ. Г.PohodnyaY. G.noemail@neicon.ruСкрягинаТ. А.SkrahinaT. A.noemail@neicon.ruЛапкоА. Г.LapkoA. G.noemail@neicon.ruМеждународный государственный экологический университет им А.Д. СахароваInternational Sakharov Environmental University20052812200504131136Copyright © Походня Ю.Г., Скрягина Т.А., Лапко А.Г., 20052005Походня Ю.Г., Скрягина Т.А., Лапко А.Г.Pohodnya Y.G., Skrahina T.A., Lapko A.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.gsmu.by/jour/article/view/396

Гомогенные, биологически активные фармакологические препараты могут быть получены практически в неограниченных количествах биотехнологическими методами. Технология получения рекомбинантных белков постоянно совершенствуется по направлениям повышения уровня экспрессии и сокращения стадий очистки протеина. Предложен метод однастадийного клонирования рекомбинантного His-Tag фьюжен адренодоксина с сохранением преимуществ вектора для периплазматической его экспрессии. Подобрана система детергентов для эффективного лизиса бактериальных клеток.

Biotechnology methods allow getting homogenous biologically active preparations in virtually unlimited quantities. Recombinant protein purification technology is being constantly improved to increase expression level and minimization of number of protein purification stages. This paper introduces the new method of one-stage recombinant His-Tag fusion adrenodoxin cloning. It keeps all vector advantages for its periplasmatic expression. In this issue, optimized detergents system for effective lysis of bacteria cells has been described.

адренодоксинклонированиепериплазматическая экспрессиясмесь детергентоваффинная хроматографияadrenodoxincloningperiplasmatic exprecciondetergent mixtureaffinity Tag technologiesадренодоксинклонированиепериплазматическая экспрессиясмесь детергентоваффинная хроматографияadrenodoxincloningperiplasmatic exprecciondetergent mixtureaffinity Tag technologiesReferencesUhlmann H., Beckert V., Schwarz D. and Bernhardt R. Expression of bovine adrenodoxin in E. coli and site-directed mutagenesis of [2Fe-2S] cluster ligands, Biochem. Biophys // Res. Commun. - 1992. - Vol. 188. - P. 1131-1138.Uhlmann H., Beckert V., Schwarz D. and Bernhardt R. Expression of bovine adrenodoxin in E. coli and site-directed mutagenesis of [2Fe-2S] cluster ligands, Biochem. Biophys // Res. Commun. - 1992. - Vol. 188. - P. 1131-1138.Wang W. and Malcolm B.A. Two-Stage PCR protocol allowing introduction of multiple mutations, deletions and insertions using QuikChange Site-Direction Mutagenesis // BioTechniques. - 1999. - Vol. 26. - № 4. - Р. 680-682.Wang W. and Malcolm B.A. Two-Stage PCR protocol allowing introduction of multiple mutations, deletions and insertions using QuikChange Site-Direction Mutagenesis // BioTechniques. - 1999. - Vol. 26. - № 4. - Р. 680-682.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.