Воропаева Алла Викторовна, кандидат биологических наук, доцент, врач клинической лабораторной диагностики
Гомель
Alla V. Voropaeva, Candidate of Biological Sciences, Associate Professor, Physician of Clinical Laboratory Diagnostics
Gomel
Борсук Алексей Дмитриевич, заведующий отделением, врач-эндоскопист
Гомель
Alexey D. Borsuk, Head of the Department, Endoscopist
Gomel
Шевченко Наталья Ивановна, кандидат биологических наук, доцент, заведующий лабораторией клеточных технологий
Гомель
Natalia I. Shevchenko, Candidate of Biological Science, Head of the Cell Technology Laboratory
Gomel
Мартыненко Светлана Михайловна, биолог лаборатории клеточных технологий
Гомель
Sviatlana M. Martynenko, Biologist in the Laboratory of Cell Еechnologies
Gomel
Цель исследования. Изучить первичную резистентность H. pylori к кларитромицину жителей Гомельской области методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР РВ) с использованием TaqMan® MGB-зондов.
Материалы и методы. В исследование включено 184 пациента с диагнозом гастрита и дуодениа, K29, медиана возраста — 48,5 года (25 и 75 % — 37 и 61 год). Согласно анкетным данным пациентов, эрадикационная терапия с применением кларитромицина не проводилась. Для определения резистентности H. pylori к кларитромицину использовали метод ПЦР РВ с применением TagMan® MGB-зондов.
Результаты. Все 184 исследуемых образца ДНК были положительными по гену Rnase P (ВКО) и учитывались при дальнейшем анализе (Ct, HEX 20,20–34,14). ДНК гена cagH (Ct, FAM 21,26–33,04), свидетельствующая об инфицировании бактерией, подтверждена в 152 образцах (82,6 %). ДНК гена 23SrRNA (точечные мутации A2142G и A2143G) выявлена в 16 из 152 образцов ДНК — 10,5 % (Ct, Hex 20,24–31,17). Заведомо положительные контрольные пробы имели характерный рост кривых по соответствующим каналам детекции, в заведомо отрицательных — рост кривых не отмечен.
Заключение. Первичная резистентность Н. pylori к кларитромицину у жителей Гомельской области составила 10,5 %, и применение тройной эрадикационной терапии первой линии, включающей ИПП, амоксициллин и кларитромицин, в качестве эмпирической в данном регионе согласуется с рекомендациями Mаастрихт III-VI и постановлением Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 01.06.2017 № 54: клинический протокол «Диагностика и лечение пациентов с заболеваниями органов пищеварения». Применение ПЦР РВ с использованием TaqMan® MGB-зондов обосновано для определения резистентности H. pylori к кларитромицину, назначения индивидуализированного лечения и оценки эффективности схем эрадикации.
Objective. To study primary resistance of H. pylori to clarithromycin in residents of Gomel region by real-time polymerase chain reaction (PCR RT) using TaqMan® MGB probes.
Materials and methods. The study included 184 patients diagnosed with gastritis and duodenitis, K29, median age 48.5 years (25% and 75% were 37 and 61 years old). According to the patients’ questionnaires, no clarithromycin-based eradication therapy was administered. To determine the resistance of H. pylori to clarithromycin, a PCR RV method using TagMan® MGB probes was used.
Results. All 184 tested DNA samples were positive for the Rnase P gene (ICS) and were considered in further analysis (Ct, HEX 20.20-34.14). DNA from the cagH gene (Ct, FAM 21.26-33.04), indicating infection with the bacterium, was confirmed in 152 samples (82.6%). DNA from the 23SrRNA gene (point mutations A2142G and A2143G) was detected in 16 of 152 DNA samples 10.5 % (Ct, Hex 20.24-31.17). The positive control samples had characteristic curve growth in the corresponding detection channels; no curve growth was observed in the negative samples.
Conclusion. The primary resistance of H. pylori to clarithromycin in the residents of Gomel region was 10.5%, and the use of triple first-line eradication therapy, including PPIs, amoxicillin and clarithromycin, as empirical in this region is consistent with the Maastricht III-VI recommendations and Decree of the Ministry of Health of the Republic of Belarus of 01.06.2017 № 54: clinical protocol “Diagnosis and treatment of patients with digestive diseases.” The use of PCR RT using TaqMan® MGB probes is justified to determine the resistance of H. pylori to clarithromycin, to prescribe individualized treatment and to evaluate the effectiveness of eradication regimens.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.