zdorПроблемы здоровья и экологииHealth and Ecology Issues2220-09672708-6011Gomel State Medical University10.51523/2708-6011.2016-13-1-10zdor-1667Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНА И БИОЛОГИЯEXPERIMENTAL MEDICINE AND BIOLOGYМЕТОД МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ПРОЦЕССОВ КЛЕТОЧНОЙ СЕНЕСЦЕНЦИИ НА ОСНОВЕ КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА ГЕНОВ ЯДЕРНОЙ И МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДНКTHE METHOD OF MOLECULAR AND GENETIC DIAGNOSIS OF THE PROCESS OF CELL SENESCENCE BASED ON QUANTITATIVE ANALYSIS OF NUCLEAR AND MITOCHONDRIAL DNA GENESВоропаевЕ. В.VoropayevE. V.noemail@neicon.ruЗятьковА. А.ZiatskovA. A.noemail@neicon.ruОсипкинаО. В.OsipkinaO. V.noemail@neicon.ruБарановО. Ю.BaranovO. Y.noemail@neicon.ruГалиновскаяН. В.GalinovskayaN. V.noemail@neicon.ruДоценкоВ. Н.DotsenkoV. N.noemail@neicon.ruГомельский государственный медицинский университетGomel State Medical UniversityГомельская городская клиническая больница скорой медицинской помощиGomel City Clinical Emergency Hospital201628032016014650Copyright © Воропаев Е.В., Зятьков А.А., Осипкина О.В., Баранов О.Ю., Галиновская Н.В., Доценко В.Н., 20162016Воропаев Е.В., Зятьков А.А., Осипкина О.В., Баранов О.Ю., Галиновская Н.В., Доценко В.Н.Voropayev E.V., Ziatskov A.A., Osipkina O.V., Baranov O.Y., Galinovskaya N.V., Dotsenko V.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.gsmu.by/jour/article/view/1667

Цель: апробировать метод молекулярно-генетической диагностики процессов клеточной сенесценции на основе количественного анализа генов ядерной (яДНК) и митохондриальной ДНК (мтДНК). Материалы и методы. Выборка пациентов составила 81 человек, материал для исследований - цельная кровь. Количественный анализ мтДНК проведен с применением метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ) по протоколу TaqMan. Оценка значимости различий средних величин отношения мтДНК/яДНК возрастных групп проведена методом однофакторного дисперсионного анализа. Результаты. Различие средних величин отношения мтДНК/яДНК возрастных групп статистически значимо на уровне р < 0,05, сила влияния фактора возраста составляет 46 %. Заключение. Апробированный метод, основанный на расчете отношения числа копий локусов мтДНК (mtND1) к яДНК (RPPH1) с применением стандартов, может быть использован для количественного анализа мтДНК как генетического маркера возраст-ассоциированных изменений.

Objective: to test the method of molecular and genetic diagnosis of cellular senescence based on quantitative analysis of nuclear genes (nDNA) and mitochondrial DNA (mtDNA). Material and methods. The sample of patients was 81, the material for the study - whole blood. The quantitative analysis of mtDNA was carried out using the method of polymerase chain reaction in real time (RT-PCR) protocol TaqMan. The differences of average values of the relation of mtDNA/nDNA age groups were assessed by one-way ANOVA. Results. The difference between the average value of the ratio of mtDNA / nDNA age groups is statistically significant at p < 0.05, the strength of the influence of the age factor is 46 %. Conclusion. The proven method based on the calculation of the ratio of mtDNA copy number loci (mtND1) to nuclear DNA (RPPH1) with the application of the standards can be used for the quantitative analysis of mtDNA as a genetic marker of age-related changes.

отношение тДНК/яДНКвозраст-ассоциированные заболеваниягруппы рискаthe ratio of mtDNA/nuclear DNAage-associated disease riskReferencesКишкун, А. А. Биологический возраст и старение: возможности определения и пути коррекции / А. А. Кишкун. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 976 с.Кишкун, А. А. Биологический возраст и старение: возможности определения и пути коррекции / А. А. Кишкун. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 976 с.Wei, Y. H. Oxidative stress and mitochondrial DNA mutations in human aging / Y. H. Wei // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. - 1998. - № 217 (1). - Р. 53-63.Wei, Y. H. Oxidative stress and mitochondrial DNA mutations in human aging / Y. H. Wei // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. - 1998. - № 217 (1). - Р. 53-63.Sherratt, H. S. Mitochondria: structure and function / H. S. Sherratt // Rev. Neurol. - 1991. - Vol. 147. - P. 417-430.Sherratt, H. S. Mitochondria: structure and function / H. S. Sherratt // Rev. Neurol. - 1991. - Vol. 147. - P. 417-430.Игамбердиев, А. У. Уникальная генетическая система митохондрий / А. У. Игамбердиев // Сорос. образоват. журн. - 2000. - № 1. - С. 32-36.Игамбердиев, А. У. Уникальная генетическая система митохондрий / А. У. Игамбердиев // Сорос. образоват. журн. - 2000. - № 1. - С. 32-36.Сухоруков, В. С. Митохондриальная патология и проблемы патогенеза психических нарушений / В. С. Сухоруков // Журнал неврологии и психиатрии. - 2008. - № 6. - С. 83-90.Сухоруков, В. С. Митохондриальная патология и проблемы патогенеза психических нарушений / В. С. Сухоруков // Журнал неврологии и психиатрии. - 2008. - № 6. - С. 83-90.Wolf, A. Study of the Change in Mitochondrial DNA from Various Tissues of Mice of Varying Ages / A. Wolf, A. Karlsson // Research Academyfor Young Scientists. - 2013. - № 1. - P. 1-15.Wolf, A. Study of the Change in Mitochondrial DNA from Various Tissues of Mice of Varying Ages / A. Wolf, A. Karlsson // Research Academyfor Young Scientists. - 2013. - № 1. - P. 1-15.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.