zdorПроблемы здоровья и экологииHealth and Ecology Issues2220-09672708-6011Gomel State Medical University10.51523/2708-6011.2014-11-4-17zdor-1557Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНА И БИОЛОГИЯEXPERIMENTAL MEDICINE AND BIOLOGYМЕТОДИКИ ТРЕКИНГА ТРАНСПЛАНТИРОВАННЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК В ОРГАНИЗМЕ РЕЦИПИЕНТАСкуратовА. Г.noemail@neicon.ruЛызиковА. Н.noemail@neicon.ruПетреневД. Р.noemail@neicon.ruGomel State Medical UniversityBelarusInstitute of Radiobiology NAS of Belarus, GomelBelarus201428122014048489Copyright © Скуратов А.Г., Лызиков А.Н., Петренев Д.Р., 20142014Скуратов А.Г., Лызиков А.Н., Петренев Д.Р.Скуратов А.Г., Лызиков А.Н., Петренев Д.Р.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.gsmu.by/jour/article/view/1557

Цель: охарактеризовать и применить в эксперименте современные методики трекинга мезенхимальных стволовых клеток в организме реципиента после трансплантации. Материалы и методы. Мезенхимальные стволовые клетки из жировой ткани (выделение, культивирование, окраска флуоресцентными красителями PKH67 и Dil); лабораторные крысы линии Вистар; экспериментальная модель CCl4-индуцированного хронического гепатита; введение меченных мезенхимальных стволовых клеток в организм лабораторных животных; флуоресцентная микроскопия криосрезов органов; ПЦР-анализ копийности гена Sry. Результаты. Апробированные методики трекинга мезенхимальных стволовых клеток показали информативность мечения клеток флуоресцентными красителями и последующего изучения миграции их в организме реципиента при анализе флуоресцентной микроскопии криосрезов органов. Были выявлены очаги яркой желто-зеленой (РКН 67) или красной (Dil) флуоресценции размером с клетку, колокализованные с клеточными ядрами. Для оценки приживления клеток в отдаленном периоде применена методика выявления гена Sry в организме реципиента женского пола после введения стволовых клеток, выделенных от мужской особи. Показано выживание мезенхимальных стволовых клеток через 45 дней после трансплантации. Заключение. Исследование трекинга трансплантированных мезенхимальных стволовых клеток в организме реципиента в ранние сроки (1-2 недели) информативно с помощью методики прижизненного мечения их липофильными флуоресцентными красителями. В отдаленный посттрансплантационный период о приживлении клеток можно судить по выявлению гена Sry при разнополой родственной трансплантации.

мезенхимальные стволовые клеткифлуоресцентные красители PKH67 и Dilфлуоресцентная микроскопияSry генПЦР-анализmesenchymal stem cellsfluorescent dyes PKH67 and Dilfluorescence microscopySry genePCR analysisReferencesКирик, В. М. Стволовые клетки из жировой ткани: основные характеристики и перспективы клинического применения в регенеративной медицине / В. М. Кирик, Г. М. Бутенко // Журн. АМН України. - 2010. - Т. 16, № 4. - С. 576-604.Кирик, В. М. Стволовые клетки из жировой ткани: основные характеристики и перспективы клинического применения в регенеративной медицине / В. М. Кирик, Г. М. Бутенко // Журн. АМН України. - 2010. - Т. 16, № 4. - С. 576-604.Яргин, С. В. Стволовые клетки и клеточная терапия: на подступах к научному подходу / С. В. Яргин // Цитология. - 2010. - Т. 52, № 11. - С. 918-920.Яргин, С. В. Стволовые клетки и клеточная терапия: на подступах к научному подходу / С. В. Яргин // Цитология. - 2010. - Т. 52, № 11. - С. 918-920.A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compact bone / H. Zhu [et. al.] // Nat Protoc. - 2010. - Vol. 5(3). - P. 550-600.A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compact bone / H. Zhu [et. al.] // Nat Protoc. - 2010. - Vol. 5(3). - P. 550-600.Barry, F. P. Mesenchymal stem cells: clinical applications and biological characterization / F. P. Barry, J. M. Murphy // Int J Biochem Cell Biol. - 2004. - Vol. 36(4). - P. 568-584.Barry, F. P. Mesenchymal stem cells: clinical applications and biological characterization / F. P. Barry, J. M. Murphy // Int J Biochem Cell Biol. - 2004. - Vol. 36(4). - P. 568-584.Dan, Y. Y. Liver stem cells: a scientific and clinical perspective / Y. Y. Dan, G. C. Yeoh // J. Gastroenterol. Hepatol. - 2008. - Vol. 23. - P. 687-698.Dan, Y. Y. Liver stem cells: a scientific and clinical perspective / Y. Y. Dan, G. C. Yeoh // J. Gastroenterol. Hepatol. - 2008. - Vol. 23. - P. 687-698.Locating the stem cell niche and tracing hepatocyte lineages in human liver / T. G. Fellous [et al.] // Hepatology. - 2009. - Vol. 49. - P. 1655-1663.Locating the stem cell niche and tracing hepatocyte lineages in human liver / T. G. Fellous [et al.] // Hepatology. - 2009. - Vol. 49. - P. 1655-1663.Fluorescent cell labeling for in vivo and in vitro cell tracking / P. K. Horan [et. al.] // Methods in Cell Biology. - 1990. - Vol. 33. - P. 469.Fluorescent cell labeling for in vivo and in vitro cell tracking / P. K. Horan [et. al.] // Methods in Cell Biology. - 1990. - Vol. 33. - P. 469.Gokhale, P. J. A prospective on stem cell research / P. J. Gokhale, P. W. Andrews // Semin Reprod Med. - 2006. - Vol. 24(5). - P. 289-297.Gokhale, P. J. A prospective on stem cell research / P. J. Gokhale, P. W. Andrews // Semin Reprod Med. - 2006. - Vol. 24(5). - P. 289-297.Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells / P. A. Zuk [et. al.] // Mol Biol Cell. - 2002. - Vol. 13(12). - P. 4279-4295.Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells / P. A. Zuk [et. al.] // Mol Biol Cell. - 2002. - Vol. 13(12). - P. 4279-4295.Meirelles, Lda S. Methodology, biology and clinical applications of mesenchymal stem cells / Lda. S. Meirelles, N. B. Nardi // Front Biosci. - 2009. - № 14. - P. 4281-4298.Meirelles, Lda S. Methodology, biology and clinical applications of mesenchymal stem cells / Lda. S. Meirelles, N. B. Nardi // Front Biosci. - 2009. - № 14. - P. 4281-4298.Meirelles, Lda S. In search of the in vivo identity of mesenchymal stem cells / Lda. S. Meirelles, A. I. Caplan, N. B. Nardi // Stem Cells. - 2008. - 26(9). - P. 2287-2299.Meirelles, Lda S. In search of the in vivo identity of mesenchymal stem cells / Lda. S. Meirelles, A. I. Caplan, N. B. Nardi // Stem Cells. - 2008. - 26(9). - P. 2287-2299.Concise review: Therapeutic potential of mesenchymal stem cells for the treatment of acute liver failure and cirrhosis / V. Volarevic [et al.] // Stem Cells. - 2014. - Aug 22. - doi. 10. - P. 1002; 1818.Concise review: Therapeutic potential of mesenchymal stem cells for the treatment of acute liver failure and cirrhosis / V. Volarevic [et al.] // Stem Cells. - 2014. - Aug 22. - doi. 10. - P. 1002; 1818.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.