zdorПроблемы здоровья и экологииHealth and Ecology Issues2220-09672708-6011Gomel State Medical University10.51523/2708-6011.2013-10-3-22zdor-1410Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНА И БИОЛОГИЯEXPERIMENTAL MEDICINE AND BIOLOGYЭКСПРЕССИЯ МАРКЕРНЫХ ГЕНОВ ГЕПАТОЦИТ-ПОДОБНЫМИ КЛЕТКАМИ, ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫМИ ИЗ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОКEXPRESSION OF MARKER GENES BY HEPATOCYTE-LIKE CELLS differentiated from mesenchymal stem cellsСкуратовА. Г.SkuratovA. G.noemail@neicon.ruПетреневД. Р.PetrenyovD. R.noemail@neicon.ruКондрачукА. Н.KondrachukA. N.noemail@neicon.ruГомельский государственный медицинский университетGomel State Medical University20132809201303105110Copyright © Скуратов А.Г., Петренев Д.Р., Кондрачук А.Н., 20132013Скуратов А.Г., Петренев Д.Р., Кондрачук А.Н.Skuratov A.G., Petrenyov D.R., Kondrachuk A.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.gsmu.by/jour/article/view/1410

Цель: исследовать экспрессию маркерных генов гепатоцит-подобными клетками, дифференцированными из мезенхимальных стволовых клеток (МСК). Материалы и методы. Белые крысы линии Вистар, костномозговые МСК; изолированные гепатоциты крысы, полученные методом ферментативной перфузии печени; дифференцировка МСК в гепатоцитарном направлении; световая микроскопия; оценка экспрессии генов методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Результаты. Наблюдаемые изменения в профиле экспрессии генов на протяжении этапов дифференцировки свидетельствуют о присутствии в культуре МСК клеток, дифференцированных в гепатоцитарном направлении. Экспрессия генов Carbox, Krt18, Krt19 и Cyt1A1 в большой степени зависит от состава среды, не является постоянной и носит индуцибельный характер. Представляется важным дальнейший поиск молекулярно-генетических маркеров дифференцировки МСК в гепатоцитарном направлении. Полученные результаты демонстрируют необходимость систематизации имеющихся данных об изменениях уровня экспрессии генов при дифференцировке МСК в гепатоциты с целью унификации условий оценки профиля экспрессии генов.

Objective: to investigate the expression of marker genes by hepatocyte-like cells differentiated from mesenchymal stem cells (MSCs). Materials and methods. Wistar white rats, bone marrow MSCs, isolated hepatocytes of the rats were obtained by enzymatic perfusion of liver; differentiation of MSCs in hepatocyte direction; light microscopy; investigation of expression of genes by polymerase chain reaction (PCR). Results. The observed changes in the gene expression profile during the stages of differentiation indicate the presence of the cells differentiated into hepatocytic direction in MSCs culture. The expression of Carbox, Krt18, Krt19 Cyt1A1 genes depends on the composition of the medium and is not permanent and inducible in nature. It is important to go on searching for the molecular markers of MSCs differentiation in the hepatocytic direction. These results demonstrate the necessity to systematize the available data on the changes in the levels of gene expression during MSCs differentiation into hepatocytes to unify the conditions of assessment of the gene expression profiling.

мезенхимальные стволовые клеткиизолированные гепатоцитыгепатоцитарная дифференцировкаэкспрессия геновmesenchymal stem cellsisolated hepatocytesdifferentiation into hepatocytic directiongene expressionReferencesДолгих, М. С. Перспективы терапии печеночной недостаточности с помощью стволовых клеток / М. С. Долгих // Биомедицинская химия. - 2008. - Т. 54, Вып. 4. - С. 376-391.Долгих, М. С. Перспективы терапии печеночной недостаточности с помощью стволовых клеток / М. С. Долгих // Биомедицинская химия. - 2008. - Т. 54, Вып. 4. - С. 376-391.Fitzpatrick, E. Human hepatocyte transplantation: state of the art / E. Fitzpatrick, R. R. Mitry, A. Dhawan // J. Intern. Med. - 2009. - Vol. 266. - P. 339-357.Fitzpatrick, E. Human hepatocyte transplantation: state of the art / E. Fitzpatrick, R. R. Mitry, A. Dhawan // J. Intern. Med. - 2009. - Vol. 266. - P. 339-357.Bone marrow stem cells and the liver: are they relevant? / M. A. Eckersley-Maslin [et. al.] // J. Gastroenterol Hepatol. - 2009. - №24. - P. 1608-1616.Bone marrow stem cells and the liver: are they relevant? / M. A. Eckersley-Maslin [et. al.] // J. Gastroenterol Hepatol. - 2009. - №24. - P. 1608-1616.A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compact bone / H. Zhu [et. al.] // Nat Protoc. - 2010. - № 5(3). - P. 550-560.A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compact bone / H. Zhu [et. al.] // Nat Protoc. - 2010. - № 5(3). - P. 550-560.Дифференцировка мезенхимальных стволовых клеток костного мозга в гепатоцитподобные клетки in vitro / Я. И. Исайкина [и др.] // Вести Национальной Академии Наук Беларуси. - 2011. - № 1. - С. 10-15.Дифференцировка мезенхимальных стволовых клеток костного мозга в гепатоцитподобные клетки in vitro / Я. И. Исайкина [и др.] // Вести Национальной Академии Наук Беларуси. - 2011. - № 1. - С. 10-15.Hepatocytic differentiation of mesenchymal stem cells incocultures with fetal liver cells / C. Lange [et. al.] // World J. Gastroenterol. - 2006. - № 12. - P. 2394-2397.Hepatocytic differentiation of mesenchymal stem cells incocultures with fetal liver cells / C. Lange [et. al.] // World J. Gastroenterol. - 2006. - № 12. - P. 2394-2397.Seglen, P. O. Preparation of rat liver cells / P. O. Seglen // Methods Cell Biol. - 1976. - № 13. - Р. 29-83.Seglen, P. O. Preparation of rat liver cells / P. O. Seglen // Methods Cell Biol. - 1976. - № 13. - Р. 29-83.Primer-BLAST: a tool to design target-specific primers for polymerase chain reaction / J. Ye [et. al.] // BMC Bioinformatics. - 2012 - № 13. - P. 134.Primer-BLAST: a tool to design target-specific primers for polymerase chain reaction / J. Ye [et. al.] // BMC Bioinformatics. - 2012 - № 13. - P. 134.Selection of reference genes for quantitative real-time PCR in a rat asphyxial cardiac arrest model / K. Langnaese [et al.] // BMC Molecular Biology. - 2008. - Vol. 9, № 1. - P. 53.Selection of reference genes for quantitative real-time PCR in a rat asphyxial cardiac arrest model / K. Langnaese [et al.] // BMC Molecular Biology. - 2008. - Vol. 9, № 1. - P. 53.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.