zdorПроблемы здоровья и экологииHealth and Ecology Issues2220-09672708-6011Gomel State Medical University10.51523/2708-6011.2013-10-2-25zdor-1384Research ArticleЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНА И БИОЛОГИЯEXPERIMENTAL MEDICINE AND BIOLOGYФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПРИ ИХ ДИФФЕРЕНЦИРОВКЕ В ГЕПАТОЦИТАРНОМ НАПРАВЛЕНИИPHENOTYPIC CHANGES OF MESENCHYMAL STEM CELL IN THEIR DIFFERENTIATION IN HEPATOCYTIC DIRECTIONСкуратовА. Г.SkuratovA. G.noemail@neicon.ruПетреневД. Р.PetrenyovD. R.noemail@neicon.ruКондрачукА. Н.KondrachukA. N.noemail@neicon.ruВоропаевЕ. В.VoropayevY. V.noemail@neicon.ruГомельский государственный медицинский университетGomel State Medical University20132806201302134138Copyright © Скуратов А.Г., Петренев Д.Р., Кондрачук А.Н., Воропаев Е.В., 20132013Скуратов А.Г., Петренев Д.Р., Кондрачук А.Н., Воропаев Е.В.Skuratov A.G., Petrenyov D.R., Kondrachuk A.N., Voropayev Y.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.gsmu.by/jour/article/view/1384

Цель работы: оценить фенотипические изменения мезенхимальных стволовых клеток (МСК) при их дифференцировке в гепатоцитарном направлении. Материалы и методы. Костномозговые МСК; изолированные гепатоциты, выделенные методом ферментативной перфузии печени; направленная гепатогенная дифференцировка МСК согласно имеющимся и адаптированным протоколам; световая микроскопия; оценка функциональной способности гепатоцит-подобных клеток синтезировать и накапливать гликоген. Результаты. Наблюдаемые изменения в фенотипе на протяжении этапов дифференцировки свидетельствуют о присутствии в культуре клеток, дифференцированных в гепатоцитарном направлении. МСК приобретали сначала веретенообразный фенотип, который затем сменялся полигональным с многочисленными выростами мембраны. Обнаружены кластеры гепатоцит-подобных клеток с положительной реакцией на гликоген. Наличие ростовых факторов дифференцировочных сред и выделяемых первичными гепатоцитами оказывало «стабилизирующее» влияние на культуру МСК.

Objective: to evaluate the phenotypic changes of mesenchymal stem cells (MSCs) in their differentiation in hepatocytic direction. Materials and methods. Bone-marrow MSCs; hepatocytes isolated by enzymatic perfusion of the liver; directed hepatocytic differentiation of MSCs according to the available and adapted protocols, light microscopy, evaluation of the functional capacity of hepatocyte-like cells to synthesize and accumulate glycogen. Results. The changes observed in the phenotype during differentiation stages indicate the presence of cells differentiated in hepatocytic direction in the culture. MSCs first gained a spindle-shaped phenotype, which then changed to a polygonal membrane with numerous appendages. The clusters of hepatocyte-like cells positive for glycogen were found. The presence of growth factors, differentiation media and allocated primary hepatocytes had a «stabilizing» effect on the culture of MSCs.

мезенхимальные стволовые клеткиизолированные гепатоцитыгепатогенная дифференцировкаmesenchymal stem cellsisolated hepatocytesdifferentiation in hepatocytic directionReferencesSpheroid formation and differentiation into hepatocyte-like cells of rat mesenchymalstem cell induced by co-culture with liver cells / Q. Zhang [et al.] // DNA CellBiol. - 2007. - № 26. - P. 497-503.Spheroid formation and differentiation into hepatocyte-like cells of rat mesenchymalstem cell induced by co-culture with liver cells / Q. Zhang [et al.] // DNA CellBiol. - 2007. - № 26. - P. 497-503.Hepatocytic differentiation of mesenchymal stem cells in cocultures with fetal liver cells / C. Lange [et al.] // World J Gastroenterol. - 2006. - № 12. - P. 2394-2397.Hepatocytic differentiation of mesenchymal stem cells in cocultures with fetal liver cells / C. Lange [et al.] // World J Gastroenterol. - 2006. - № 12. - P. 2394-2397.In vitro differentiation of mouse bone marrow stromal stem cells into hepatocytes induced by conditioned culture medium of hepatocytes / Y. Chen [et al.] // J. Cell. Biochem. - 2007. - № 102. - P. 52-63.In vitro differentiation of mouse bone marrow stromal stem cells into hepatocytes induced by conditioned culture medium of hepatocytes / Y. Chen [et al.] // J. Cell. Biochem. - 2007. - № 102. - P. 52-63.Hepatic stellate cells modulate differentiation of bone marrow mesenchymal cells into hepatocyte-like cells / X. Deng [et. al.] // J. Cell. Physiol. - 2008. - № 217. - P. 138-144.Hepatic stellate cells modulate differentiation of bone marrow mesenchymal cells into hepatocyte-like cells / X. Deng [et. al.] // J. Cell. Physiol. - 2008. - № 217. - P. 138-144.Clonal mesenchymal stem cells derived from human bone marrow can differentiate into hepatocyte-like cells in injured livers of SCID mice / X. R. Tao [et al.] // J. Cell. Biochem. - 2009. - № 108. - P. 693-704.Clonal mesenchymal stem cells derived from human bone marrow can differentiate into hepatocyte-like cells in injured livers of SCID mice / X. R. Tao [et al.] // J. Cell. Biochem. - 2009. - № 108. - P. 693-704.A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compact bone / H. Zhu [et al.] // Nat. Protoc. - 2010. - № 5(3). - P. 550-560.A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse compact bone / H. Zhu [et al.] // Nat. Protoc. - 2010. - № 5(3). - P. 550-560.Seglen, P. O. Preparation of rat liver cells / P. O. Seglen // Methods Cell Biol. - 1976. - № 13. - Р. 29-83.Seglen, P. O. Preparation of rat liver cells / P. O. Seglen // Methods Cell Biol. - 1976. - № 13. - Р. 29-83.Дифференцировка мезенхимальных стволовых клеток костного мозга в гепатоцитподобные клетки in vitro / Я. И. Исайкина [и др.] // Вести Национальной Академии Наук Беларуси. - 2011. - № 1. - С. 10-15.Дифференцировка мезенхимальных стволовых клеток костного мозга в гепатоцитподобные клетки in vitro / Я. И. Исайкина [и др.] // Вести Национальной Академии Наук Беларуси. - 2011. - № 1. - С. 10-15.Liver-specific gene expression in mesenchymal stem cells is induced by liver cells / C. Lange [et al.] // World J Gastroenterol. - 2005. - № 11(29). - P. 4497-4504.Liver-specific gene expression in mesenchymal stem cells is induced by liver cells / C. Lange [et al.] // World J Gastroenterol. - 2005. - № 11(29). - P. 4497-4504.Hepatic Differentiation of Mesenchymal Stem Cells: In Vitro Strategies / S. Snykers [et al.] // in Mesenchymal Stem Cell Assays and Applications, Methods in Molecular Biology. - Vol. 698 - P. 305-314.Hepatic Differentiation of Mesenchymal Stem Cells: In Vitro Strategies / S. Snykers [et al.] // in Mesenchymal Stem Cell Assays and Applications, Methods in Molecular Biology. - Vol. 698 - P. 305-314.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.